培养温度和气体环境

温度：37°C 

CO₂浓度：5% 

湿度：通常保持高湿度，如95%

培养基配置

• 基础培养基 DMEM/F12：通常使用DMEM/F12（Dulbecco's Modified Eagle Medium / Nutrient Mixture F-12）混合培养基。 

• 生长因子 EGF&FGF-2：加入表皮生长因子（EGF）和成纤维细胞生长因子（FGF-2），浓度一般为20 ng/mL。 

• 补充剂 B27& N2：通常还包括B27补充剂、N2补充剂等，这些补充剂提供了必需的维生素、氨基酸和其他生长因子。 

• 抗生素 青霉素/链霉素：加入抗生素如青霉素/链霉素以防止污染。

细胞传代

使用胰蛋白酶或TrypLE等酶解试剂将细胞从培养皿上解离下来。 每次传代时稀释细胞至适当的密度（例如1:2或1:3）。

分化条件

如果需要诱导神经干细胞分化，可以去除EGF和FGF-2，并加入其他诱导因子，如BMPs（骨形态发生蛋白）或RA（视黄酸）等。

观察和监测

定期观察细胞形态和生长情况。 进行必要的细胞计数和活力检测。

质量控制

定期进行细胞鉴定，确保细胞仍保持神经干细胞的特性。 可以通过免疫荧光染色或流式细胞术检测特定的神经干细胞标记物，如Nestin、Sox2等。

优化的内部结构设计：Sphericalplate 5D^® 培养板的每个孔底部都有一个特殊的几何形状，这种形状能够引导细胞聚集形成球形，微孔顶部的锋利边缘防止细胞在微孔以外的区域沉降，微孔的高度专门设计用于保留细胞簇，便于培养基的更换。

提供均一的培养条件，提高细胞存活率：

通过提供一致的培养条件，可以减少实验结果中的变异，提高数据的可靠性。通过促进细胞间的紧密接触，可以提高细胞存活率，同时减少细胞死亡和凋亡的情况。 

简化操作流程，提高实验效率：

相比于传统的二维细胞培养，Sphericalplate 5D^® 简化了三维细胞培养的操作流程，接种细胞后，无需额外的离心处理，使研究人员能够更容易地进行实验。通过使用标准化的板式设计，可以轻松地进行大规模的实验操作，提高实验效率。 

无需基质胶： 

Sphericalplate 5D^® 细胞培养板内部具有微孔结构，可以模拟体内三维环境，使细胞能够在三维空间中生长，使细胞形成球状体或组织样结构，无需额外添加基质胶来模拟细胞外基质。

便于观察和分析：

SuSoS涂层表面具有低蛋白粘附性，实现细胞聚集，使得细胞形成了规则的球形结构，这使得在显微镜下观察细胞变得更加容易。由COC 制成的培养板可实现清晰的成像性能，方便进行后续的图像分析。 

兼容多种细胞类型及应用：

Sphericalplate 5D^® 适用于多种细胞类型，包括但不限于干细胞、癌细胞、神经元细胞等。除了基本的细胞培养，还可以用于药物筛选、毒性测试、疾病模型构建等多种生物学研究领域。 

易于集成到自动化系统中： 

标准化的板式设计使得Sphericalplate 5D^® 可以轻松地集成到自动化细胞培养系统中，海道尔夫现可提供6孔、24孔和96孔细胞培养板，每个板的总产量最高可达20,184个球体，实现高通量实验。